中国康复医学杂志

作者：陈侠甫,金旭红,黄邓高,邢 势,王和杰,卓泽铭,车家驹,

单位：中南大学湘雅医学院附属海口医院骨科中心，海口，570208

关键词：低强度脉冲超声脐带间充质干细胞组织工程细胞增殖成软骨分化

基金：海南省自然科学基金项目（20158297）

目的：研究低强度脉冲超声（LIPUS）对体外培养人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）增殖和成软骨分化的影响。方法：将P4代hUCMSCs随机分为对照组（C组）L30组（30mW/cm2）、L50组（50mW/cm2）、L80组（80mW/cm2），对照组予超声假照处理，各LIPUS刺激组分别刺激5、10、20min/d。LIPUS刺激后观察细胞生长情况，连续刺激1—5天后采用CCK-8检测细胞增殖活性；连续刺激并成软骨诱导培养2周后分别采用ELISA法检测软骨特异性胞外糖胺多糖（GAG）和Ⅱ型胶原蛋白（Col2）的浓度，以及细胞阿利新蓝染色和Col2、DAPI荧光染色观察上述两种软骨特异性蛋白的分布水平。结果：①LIPUS刺激5d后观察刺激5min/d时L50组细胞集落更为密集，细胞增殖活性组内比较高于L30组和L80组（P<0.05），组间比较高于对照组（P<0.05），刺激10min/d、20min/d时各实验组随着刺激强度增加细胞增殖受到抑制，以L80组抑制增殖效果最显著（P<0.05）。②LIPUS刺激并成软骨诱导5min/d时L30组细胞更为扁平宽大且阿利新蓝染色面积及Col2荧光强度较L50组、L80组及对照组更大，进一步分析胞外分泌GAG和Col2蛋白的含量为实验组高于对照组，以L30最为显著（P<0.05），刺激10min/d、20min/d时各实验组之间以及与对照组组间无显著性差异。结论：①适宜参数的LIPUS刺激促进细胞增殖，以（50mW/cm2、5min/d）最为显著，但随着刺激强度增大和刺激时间的延长，细胞的增殖能力下降；②在细胞诱导因子的协同作用下，在不影响细胞增殖率的情况下适宜参数（30mW/cm2、5min/d）的低强度脉冲超声可促进人脐带间充质干细胞成软骨分化。

来源：2019年第5期

《中国康复医学》期刊编辑部

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